層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時(shí)應(yīng)將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關(guān),但由于軟凝膠柱過(guò)高擠壓變形阻塞,一般不超過(guò)1米。
分族分離時(shí)用短柱,一般凝膠柱長(zhǎng)20-30厘米,柱高與直徑的比較5:1─10:1,凝膠床體積為樣品溶液體積的4-10倍。 分級(jí)分離時(shí)柱高與直徑之線為20:1─100:1,常用凝膠柱有50×25厘米,10×25厘米。
層析柱濾板下的死體積應(yīng)盡可能的小,如果支掌濾板下的死體積大,被分離組分之間重新混合的可能性就大,其結(jié)果是影響洗脫峰形,出現(xiàn)拖尾出象,降低分辯力。在分離時(shí),死體積不能超過(guò)總床體積的1/1000。
在原有玻璃分離柱的特性上還兼具了以下特性:
1.耐高壓:允許實(shí)驗(yàn)過(guò)程中使用較高的流速,加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
2..防爆性:外貼防爆膜,防止玻璃管子爆裂,對(duì)人員造成傷害以
3.可重復(fù):一根柱管可多次使用,大大節(jié)約了您的成本。
4.可見性:分離帶顏色復(fù)雜天然產(chǎn)物,您可以直觀的看到分離色帶
5.柱頭設(shè)計(jì),提高柱效,樣品分布更均勻
6.方便快捷的固體上樣
7.載樣量大
8.惰性材料
9.優(yōu)異的流體結(jié)構(gòu)
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